【Proteintech】 HumanKine® Cytokines & Growth Factors 在臨床應用上的7大優勢

【Proteintech】HumanKine® Cytokines & Growth Factors 在臨床應用上的7大優勢

20 世紀的 DNA 編輯和剔除技術方面取得的突破為醫學帶來了全新的可能性。

通過利用易於處理的生命系統來製造活性的人類蛋白質，Genentech 公司使用大腸桿菌（ E. coli ）製造重組胰島素成為早期著名的典範。

隨著生物醫學的不斷發展，我們深入瞭解到蛋白質需要在真核系統中經過轉譯後的修飾（如醣基化，磷酸化），以獲得更高的活性和穩定性。這推動了昆蟲和中國倉鼠卵巢（ CHO ）表達系統作為重組蛋白質生產的新發展方向。

對於人類的研究應用而言，人類細胞表達系統是最理想的選擇。

Proteintech HumanKine® 重組蛋白質的全系列產品均採用 HEK293 細胞製備，這些蛋白質具有卓越的 高生物活性、高穩定性 以及 批次間的高度一致性。

更接近天然人源蛋白的結構與轉譯後修飾修飾，使其成為理想的研究和應用工具。

Highlights: HumanKine® 重組蛋白質全系列 ( RUO & cGMP ) 產品均生產於 cGMP 標準，意味著從研究到臨床前與臨床應用的無縫過渡 ( Ready-to-use products in your GMP process )

List of Proteintech Humankine recombinant proteins and products made using Humankine human-cell expressed cytokines and growth factors

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【Proteintech】HumanKine® 重組蛋白質全系列 ( RUO & cGMP ) 產品優勢

1. 不含動物和異種成分 ( Animal component and xenobiotic free )

在產品的生產過程中，從採購到最終產品的任何階段都不使用任何來自動物組織、體液或其他衍生成分的成分。
最終產品完全不含任何動物來源的材料，確保了產品的純淨性和無動物成分的特性。
所有材料的儲存和處理都在專門的無動物設施中進行，以確保產品的高品質和符合無動物產品的標準。

2. 無標籤 ( Tag-free )

使用標籤蛋白質可能存在一些潛在的風險因素

標籤的存在可能干擾蛋白質的活性位點，進而對其生物活性產生影響。
標籤的引入也可能增加蛋白質的免疫原性，可能引發免疫反應。

這些因素都可能對蛋白質的功能和應用帶來一定的限制。
為了避免這些潛在的問題，Proteintech 採用無標籤技術進行蛋白質的表達和純化，以確保蛋白質的天然結構和生物活性不受干擾。
無標籤技術提供純淨且功能完整的蛋白質產品，以符合研究和應用的需求。

3. 原生蛋白折疊和成熟 ( Native folding and maturation )

相較於 CHO 細胞，HumanKine® 系統 ( HEK293 ) 生產的 Activin A 能夠生成更成熟的二聚體。

▲ 使用 CHO 細胞或 HumanKine® 系統 ( HEK293 ) 純化的 Activin A 蛋白，進行 SDS-PAGE 凝膠電泳並以考馬斯藍染色，顯示成熟的 Activin A 二聚體。

4. 天然人類醣基化修飾 ( Native human glycosylation )

醣基化對於蛋白質的穩定性與活性至關重要。

CHO 細胞和昆蟲細胞具有不同的醣基化機制，因此產生的醣基化蛋白可能與 HumanKine® 系統 ( HEK293 ) 純化不同。

▲ 利用高效液相層析法 ( High performance liquid chromatography, HPLC ）比較 CHO 細胞或 HumanKine® 系統 ( HEK293 ) 純化的 EPO 蛋白醣基化顯示明顯差異。Fetuin 作為陽性對照。

5. 高穩定性 ( High stability )

在無細胞的條件下，將 9 ng/mL FGFbasic-TS ( HumanKine® ）和 17 ng/mL FGF basic ( E. coli produced ) 分別置於 37°C 無異種、化學成分的細胞培養基中，連續三天每天進行 ELISA 測定濃度以評估不同表達系統生產的蛋白質穩定性。在 37˚C 放置後的第一天，無法檢測 FGF basic 蛋白濃度，而 FGF basic-TS 在第 1 天、第 2 天和第 3 天的濃度分別為其起始濃度的 60％、35％和20％與 FGF basic 相比，FGF basic-TS 降解速度大約慢 3 倍。

這些測定結果表示， HumanKine® 系統純化出的蛋白質有相對更好的穩定性。

▲ HumanKine® 系統（ FGF basic-TS，紅色）和 E. coli 純化的 FGF（ FGF basic，藍色）在 37°C 無細胞培養的穩定性比較。

6. 高活性 ( High activity )

IL-1β、IL-6 和 IL-23 是誘導人類 Th17 細胞分化至關重要的細胞因子。然而，根據過去報導指出，對於小鼠 Th17 細胞的分化很重要的 TGF-β1 並不是必需的，甚至會抑制人類 Th17 的分化。

在這項測定實驗中使用來自昆蟲，E. coli 或 HumanKine® 系統 ( HEK293 ) 純化的蛋白 IL-1β，IL-6， IL-23 以及 TGF-β1 進行 Th17 分化，並於 5 天後利用 ELISA 測定 IL-17 蛋白濃度。數據顯示，與昆蟲，E. coli 相比 HumanKine IL-1β、HumanKine IL-6 和 HumanKine IL-23 在誘導 IL-17 分泌更有效。更重要的是， HumanKine TGF-β1 也能有效增強效果。相比之下，這種來自昆蟲細胞的細胞因子僅顯示出邊際效應 (圖 D)。

結論，使用更真實的細胞因子，我們可以更有效地誘導 Th17 細胞分化，從而更準確地科學理解人體生物學過程。

▲ 透過人類CD4+細胞的 TH17 分化實驗，來自昆蟲，E. coli 或 HumanKine® 系統 ( HEK293 ) 純化的細胞因子（ A- IL1β，B- IL6，C- IL23，D- TGFβ1 ）的活性比較。

7. GMP-grade Cytokines and Growth Factors

為了促進從臨床前到臨床的平穩接軌，Humankine® 提供了一系列 RUO 和 cGMP 級重組蛋白質，這些蛋白質皆為 HEK293 人類細胞中表達和純化。
Proteintech 堅持嚴格高品質流程，通過 ISO13485 認證並符合 cGMP 標準
( 表示研究者使用 RUO 產品的所有生物測試和風險評估完成，從而節省了寶貴的時間和資源 )

Proteintech's HumanKine GMP facility