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【IBA】細胞和蛋白質分離的高性能研究工具 — Strep-tag ®

細胞和蛋白質分離的高性能研究工具 — Strep-tag ®

今天小編要來向大家介紹一款高性能研究工具 Strep-tag ^®，讓您的分離實驗更簡便，更順暢！

首先要詢問您的是

※在蛋白質分離的過程中是否有遇到…

1. 純化後蛋白質純度和產量不足
2. 必須結合用於純化和進一步分析的多個親和標籤
3. 需要優化蛋白質生產的放大
4. 膜蛋白、大蛋白或金屬蛋白較難分離
5. 所需的緩衝液條件嚴苛，例如：高鹽、去污劑、金屬離子、螯合劑或還原劑

※在細胞分離的過程中是否有遇到…

1. 分離後細胞純度、產量和活力 (viability)不足
2. 細胞在分離後被激活
3. 附著的標記試劑 (labeling reagent)影響細胞功能
4. Negative cell selection的純度太低
5. 需要處理大量樣品
6. 分離大量目標細胞時試劑成本高

不用擔心，使用Strep-tag system來做分離實驗，這些問題通通都可以解決！

Strep-tag ® 系統的特點：

• 可逆性 (Reversibility)
• 分離後仍保有目標的全部功能 (Full functionality of target material after isolation)
• 高純度 (High purities)
• 廣泛適用於各種分析應用 (Universal applicability for various analytic applications)
• 簡單的純化程序 (Simple purification procedures)

IBA專有的Strep-tag ^®技術利用了自然界中最強的非共價相互作用之一：Biotin和Streptavidin的相互作用。該系統基於合成的Strep-tag ^® II peptide和特殊設計的Streptavidin (稱為Strep-Tactin ^®)之間的高度選擇性和易於控制的相互作用，後者是已知最穩定的蛋白質之一。Strep-tag ^® II通過佔據天然配體生物素的結合口袋(binding pocket)，與Strep-Tactin ^®和Strep-Tactin ^® XT特異性結合。因此，通過過量添加競爭者，這種交互作用很容易被逆轉。 

兩個親和標籤 – 兩個Streptavidin衍生物：

Strep-tag ^® II 由八個胺基酸（Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys）組成，而 Twin-Strep-tag ^®包含該基序(motif)兩次並通過接頭串聯連接，因此由28個胺基酸組成。

兩者都表現出對streptavidin衍生物 Strep-Tactin ®及其後續產品Strep-Tactin ® XT的內在親和性，Strep-tag ^® II 與 Strep-Tactin ® (1µM)的結合親和性比streptavidin高了將近100倍。Strep-Tactin ^® XT的開發實現了Strep-Tactin ^®進一步的改進，Strep-Tactin ^® XT與 Strep-tag ^® II 的親和力可達nM而與 Twin-Strep-tag ®的親和力可達pM。

由於標籤-配體(tag-ligand)組合之間結合強度的差異，Strep-tag ^®系統已成為分離蛋白質、細胞和外泌體(exosomes)的通用工具。 

• 與重組蛋白融合後，Strep-tag ^® II 或Twin-Strep-tag ^®可在固定的Strep-Tactin ®或Strep-Tactin ^® XT 上實現高效的一步純化。
• 當與抗體衍生的Fab片段或奈米抗體融合時，Twin-Strep-tag ^®與多聚化的 Strep-Tactin ^®結合，允許基於其表面標誌物或抗原特異性捕獲和釋放目標細胞和外泌體。
• Strep-Tactin ^® (或 Strep-Tactin ^® XT)可以與微孔板(microplates)、螢光團或芯片結合，從而在分離目標材料後進行廣泛的分析應用，例如檢測、固定和相互作用研究。