【Proteintech】FlexAble antibody labeling kit 如何應用於多重免疫螢光染色(MultiPlexing) ?
【Proteintech】FlexAble Antibody Labeling Kits
如何應用於『 多重免疫螢光染色 (MultiPlexing) 』？
FlexAble antibody labeling Kits 若要搭配 "傳統一二抗" or "Conjugated 螢光抗體" 一同完成多重免疫螢光染色，
可參考以下Case Study ：
由於每個 FlexLinker 上只帶有 2個 Fluorophores ，相較於
1. Conjugated 螢光抗體 (約莫 6~8個 Fluorophores )，
2. 傳統一二抗之間接標記方式 (多於 8個 Fluorophores )，
FlexAble 嫁接好的抗體 整體的亮度會較低。
因此在初步實驗規劃時可將 低表達的Target 以 傳統法 來做，FlexAble 用於 表達量較高的Target 會很好抓到實驗條件，
至於逼不得已需反向操作時，則須多抓幾個條件來對應自身實驗。
( P.S.一切實驗安排還是以貴實驗室擁有的成像系統以及實驗目的來做抉擇 )
建議實驗步驟如下：
1. 決定好 " 哪些target " 用 " 何種方法 " 後，首先將傳統法的一抗先與sample做反應，一抗辨識後進行 wash 。
2. 隨之加入二抗並進行辨識 & wash ( 1. & 2. 依照各實驗室 or 抗體廠商提供之 Protocol 進行 )。
3. 二抗 Wash 同時，可將 Conjugated 螢光抗體 配製成欲作用之稀釋比率 / 須使用 FlexAble antibody labeling Kits 之抗體與 Kit 進行 Total 10min 之反應，反應後嫁接好螢光的抗體再配製成欲作用之稀釋比率。
4. 將 Conjugated 螢光抗體 與 嫁接好螢光的抗體 一同與 Sample 進行辨認 & wash ( 依照各實驗室or 抗體廠商提供之 Protocol 進行 )。
5. 最後再染上 DAPI 並進行拍攝。
補充 FlexAble antibody labeling Kits 實驗步驟 ( 3步驟, 10 分鐘, 完成標記 )：
相關資訊：
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