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〔Proteintech 解析大全〕如何挑選Internal Control ?

〔Proteintech 解析大全〕如何挑選Internal Control ?

Internal Control 抗體種類很多,其中包含全細胞、胞漿內控、膜內控或核蛋白內控等,如:β- actin、β- tubulin、GAPDH、
Lamin B,以下簡單介紹選擇內控抗體應遵循的原則。

1、樣本種屬來源:首先考慮實驗樣本來源於何物種。

      A、哺乳動物的組織或者細胞樣本,通常選擇 β- actin、β- tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3 等。

      B、其他稀少物種來源,可以參照文獻指導或是選擇高度保守houskeeping gene表達的蛋白質相應的抗體作為內控。

2、目標蛋白分子量:

     選擇內控抗體時,應該考慮目的蛋白分子量的大小。通常應該保證目的蛋白與內控蛋白分子量相差 5 kDa 以上但勿差距太大。

     如:目的蛋白分子量為 45 kDa,此時不適宜選擇 β-actin 作為內控,可以考慮選擇 GAPDH 或者 β- tubulin 作為內控。

3、目標蛋白表達部位:

     針對一般蛋白質檢測,GAPDH、β-actin 或 β-tubulin 可以滿足要求,而如果需要檢測細胞器蛋白時,適宜選擇對應細胞器
     內控更能體現內部參照的準確性。

     如:常用的核內控抗體有 Lamin A、Lamin B、TBP、YY1、HistoneH3。
     而對於膜蛋白檢測,常用的內控抗體為 ATP1A1。對於粒線體蛋白的檢測,常用 VDAC1 和 COX IV 作為內控抗體。


≡ 以上原則僅針對通常情況,需要特別注意的是內控的選擇還須考慮實際實驗環境狀況,
某些細胞或組織由於缺氧、糖尿病等因素會導致 GAPDH 的表達量增高,此種狀況下 GAPDH 不適合做內控;
在涉及細胞增殖相關實驗中,c-Jun 由於自身表達變化就不適合做內控;
在凋亡實驗中,TBP、Lamin 等不適合作為核內控。

在設計實驗時,應考慮上述因素影響並查詢相關文獻,如果在實驗過程中出現內控表達異常狀況,可分析其原因並調整內控選擇。

下方附上小編精心整理的 Internal Control 抗體 推薦列表,大家可以根據上述的內參抗體選擇原則,挑選最適合自己實驗條件的抗體!

Proteintech - Internal Control List

適用範圍 名稱 貨號 分子量 抗體種類 應用 樣本物種
全細胞/胞漿 Vinculin 66305-1-Ig 117kDa Mouse Mono WB, IHC, IF/ICC,
CoIP, ELISA
human, mouse, rat,
pig, zebrafish, hamster

Alpha Tubulin

66301-1-Ig

50-55 kDa

Mouse Mono WB, IHC, IF/ICC,
FC (Intra), IP, CoIP, ELISA
human, mouse, rat,
rabbit, canine, monkey,
chicken, zebrafish, sheep, goat, tick
11224-1-Ig Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC,
FC (Intra), IP, CoIP, ELISA
human, mouse, rat,
rabbit, monkey, chicken, zebrafish,
hamster, goat, p. lividus

Beta Tubulin

66240-1-Ig

50-55 kDa

Mouse Mono WB, IHC, IF/ICC,
IF-P, IP, ELISA
human, mouse, rat,
pig, zebrafish,
nematode, rabbit,
canine, monkey, chicken,
zebrafish, sheep
10094-1-AP Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC,
FC (Intra), IP, CoIP, ELISA
human, mouse, rat,
rabbit, chicken,
zebrafish, hamster,
sheep, goat, fish
Gamma Tubulin 66320-1-Ig 48-55 kDa Mouse Mono WB, IHC, IF/ICC,
FC (Intra), ELISA
human, mouse, rat, canine

Beta Actin

66009-1-Ig

42 kDa

Mouse Mono

WB, IHC, IF/ICC, FC (Intra),
IP, CoIP, ChIP, ELISA
human, mouse, rat,
pig, rabbit, canine,
monkey, chicken, zebrafish,
hamster, goat, arabidopsis,
golden hamsters, aedes albopictus

20536-1-AP

Rabbit Poly

WB, IHC, IF/ICC, IP, CoIP,
ELISA, Cell treatment
human, mouse, rat,
canine, monkey, chicken,
goat, sheep, yeast,
ochotona curzoniae,
camelus bactrianus, carp

GAPDH

60004-1-Ig

36 kDa

Mouse Mono

WB, IHC, IF/ICC,
FC (Intra), IP, CoIP, ELISA
human, mouse, rat,
pig, zebrafish, yeast,
plant, chicken, goat,
deer, whiteflies, tick,
treeshrew,
cynomorium songaricum

10494-1-AP

Rabbit Poly

WB, IHC, IF/ICC, FC (Intra),
IP, CoIP, ChIP, RIP, ELISA,
Cell treatment
human, mouse, rat,
pig, arabidopsis, cabbage,
corn, rice, chicken, goat,
sheep, yeast, leech,
treeshrew, zebra finches
細胞核膜

Lamin B1

66095-1-Ig

66-70 kDa

Mouse Mono

WB, IHC, IF/ICC, IF-P,
FC (Intra), IP, CoIP, ELISA
human, mouse, rat,
rabbit, chicken, zebrafish,
bovine, hamster

12987-1-AP

Rabbit Poly

WB, IHC, IF/ICC, IF-P,
FC (Intra), IP, ChIP, ELISA
human, mouse, rat,
pig, canine, chicken,
bovine, hamster, bombyx mori
Lamin A/C 10298-1-AP 65, 70 kDa Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC,
FC (Intra), IP, ELISA
human, mouse, rat,
monkey, duck
細胞核

YY1

66281-1-Ig

65-70 kDa

Mouse Mono WB, IHC, IF/ICC, IP,
CoIP, ChIP, RIP, ELISA
human, mouse, rat,
monkey, pig

22156-1-AP

Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC, IP,
CoIP, ChIP, ELISA
human, mouse, rat,
pig, bovine

TBP

66166-1-Ig

mouse/rat 33-36 kDa
human 37-43kDa

Mouse Mono

WB, IHC, IF/ICC, IP, ELISA human, mouse, rat, pig

22006-1-AP

Rabbit Poly

WB, IHC, IF, IP, ChIP, ELISA human, mouse, rat,
pig, monkey, sheep

PCNA

60097-1-Ig

36-38 kDa

Mouse Mono WB, IHC, IF/ICC,
IP, CoIP, ELISA
human, mouse, rat,
pig, rabbit, zebrafish
10205-2-AP Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC, IF-P,
IP, CoIP, ELISA, Cell treatment
human, mouse, rat,
rabbit, chicken, goat, sheep,
fish, ducks, medaka embryos

Histone H3

68345-1-Ig

15-17 kDa

Mouse Mono

WB, IHC, IF/ICC, FC (Intra), IP, ELISA human, mouse, rat,
pig, rabbit, canine, chicken,
zebrafish, hamster, dog, wheat

17168-1-AP

Rabbit Poly

WB, IHC, IF/ICC, FC (Intra), IP, CoIP, ChIP, ELISA human, mouse, rat,
pig, monkey, chicken, goat,
fish, arabidopsis, yellow catfish
粒線體

VDAC1/Porin

66345-1-Ig 35-37 kDa Mouse Mono WB, IHC, IF-P, FC (Intra), IP, CoIP, ELISA human, mouse, rat, pig
55259-1-AP 31 kDa Rabbit Poly WB, IHC, IF-P, FC (Intra), CoIP, ELISA, PLA human, mouse, rat,
pig, canine, monkey,
chicken, bovine, hamster, duck

VDAC1/2

10866-1-AP 31 kDa Rabbit Poly WB, IHC, IF-P, FC (Intra), CoIP, ELISA human, mouse, rat,
pig, rabbit, monkey,
zebrafish, pieris rapae

COXIV

66110-1-Ig

17-18 kDa

Mouse Mono WB, IHC, IF, IP, ELISA human, mouse, rat
11242-1-AP Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC, IP, ChIP, ELISA human, mouse, rat,
pig, canine, goat
COX4I2 11463-1-AP 17-18 kDa Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC, IP, ELISA human, mouse, rat
全血/
血漿/
血清
Transferrin 66171-1-Ig 77kDa Mouse Mono WB, IHC, IF-P, ELISA human
17435-1-AP Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC, IP, ELISA human, mouse, rat,
monkey, duck

Albumin

66051-1-Ig

66 kDa

Mouse Mono WB, IHC, IF/ICC, IP, ELISA human, mouse, rat,
pig, rabbit
16475-1-AP Rabbit Poly WB, IHC, IF/ICC, IF-P, IP, CoIP, ELISA human, mouse, rat,
goat
膜蛋白

ATP1A1

14418-1-AP

100-110 kDa

Rabbit Poly

WB, IHC, IF/ICC, FC (Intra), IP, CoIP, ELISA human, mouse, rat,
pig, chicken

ATP1A1-Specific

55187-1-AP

100-110 kDa

Rabbit Poly

WB, IHC, IF/ICC, FC (Intra), ELISA human, mouse, rat

官網連結:Loading Control Antibodies

Proteintech - Internal Control Antibodies 優勢:

身為專注免疫學領域20+年抗體應用專家,Proteintech的內參抗體又有哪些值得你心動的地方呢?

1. 內參種類齊全

Proteintech 提供針對各類樣本的全套內參抗體,
不管是胞漿/全細胞,或是核、膜、粒線體等亞細胞結構,亦或是全血/血漿/血清樣本,均可提供配套的內參抗體;
並且針對同一個目標,還可提供兔多抗、鼠單抗、重組兔單抗等多種選擇,全方位滿足實驗需求。

2. 超高稀釋比

在WB應用中,Proteintech的大部分內參抗體稀釋比可以達到1:10000,部分能達到1:100000,其中GAPDH鼠單抗(貨號:60004-1-Ig)推薦稀釋比更是高達1:50000- 1:500000!
(一支20ul的小包裝,最高可配置10L抗體工作液!(數學好的同學幫忙算算這支抗體可以用多久~>_<))

3. 超多文獻引用

如果說以上的陳述都是小編單方面的陳述,接下來的這個數據絕對客觀、可靠、又令人震撼!
根據第三方平台 CiteAb 資料統計,GAPDH鼠單抗(貨號:60004-1-Ig)目前已被全球科學家引用11909次!也是目前全球被引用最多的一支GAPDH抗體

 

除此之外,還有許多 Proteintech - Internal Control 抗體 受到科學家們的肯定,如: GAPDH兔多抗(貨號:10494-1-AP)被引用7103次;
β-Actin鼠單抗(貨號66009-1-Ig)被引用6590次;β-Actin兔多抗(貨號:20536-1-AP)被引用3981次;
α-Tubulin兔多抗(貨號:11224-1-AP)被引用1549次;α-Tubulin鼠單抗(貨號:66031-1-Ig)被引用1109次;
β-Tubulin兔多抗(貨號:10094-1-AP)被引用913次;Lamin B1兔多抗(貨號:12987-1-AP)被引用1183次;
PCNA兔多抗(貨號:10205-2-AP)引用966次;Histone-H3兔多抗(貨號:17168-1-AP )被引用953次......

 

數萬科學家的選擇,數萬個項目的真實案例驗證,充分佐證了Proteintech抗體的優質可靠!!

看到這裡,對 Proteintech - Internal Control 抗體心動了嗎?blush
 

enlightened回到標題中的問題:" 如何挑選Internal Control ? "
heart小編的答案是:" 選 Proteintech 就對啦!"

祝福所有支持 ABreal 倍思特 & Proteintech 的夥伴們,都能實驗計畫事事順利,文獻發表年年如期,科研突破屢創佳績!wink

 

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ABreal 倍思特 官網連結:【Proteintech】Western Blot (WB) 實驗結果真相大解析- 觀測分子量 vs. 預測分子量

ABreal 倍思特 官網連結:〔技術提示〕 低分子量蛋白質老是壓不到怎麼辦? 老師我不想努力了。。。

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